IF=29.4|艾迪基因LwaCas13a助力肌腱损伤免疫治疗提供新策略
喜报频传！恭贺艾迪基因客户王硕老师（上海第六人民医院）在国际知名期刊《Advanced Materials》（IF=29.4），发表文章“Targeted Macrophage CRISPR-Cas13 mRNA Editing in Immunotherapy for Tendon Injury”，研究内容涉及使用艾迪基因产品--LwaCas13a
本研究不仅为CRISPR-Cas13在组织修复中的应用提供了新的思路和策略，还为肌腱损伤的治疗提供了新的可能性和前景。通过优化递送系统和设计ROS响应型释放机制，研究团队成功地实现了对巨噬细胞内特定mRNA的高效编辑，从而调节了巨噬细胞的功能并促进了肌腱组织的修复。
1.构建CRISPR-Cas13编辑系统
研究团队首先构建了Cas13核糖核酸蛋白复合物（Cas13 RNP），这是CRISPR-Cas13编辑系统的核心组件。该复合物能够识别并切割特定的mRNA，从而实现基因编辑的目的。
2.筛选靶向巨噬细胞的递送系统
为了将Cas13 RNP有效地递送到巨噬细胞中，研究团队筛选了一系列阳离子聚合物，这些聚合物具有靶向巨噬细胞的能力。通过系统筛选，他们找到了一种能够高效地将Cas13 RNP导入巨噬细胞的递送系统。
3.设计ROS响应型释放机制
在急性肌腱损伤过程中，巨噬细胞会产生大量的活性氧（ROS）。研究团队利用这一特点，设计了一种ROS响应型释放机制，使Cas13 RNP能够在ROS的作用下从递送系统中释放出来，从而实现对巨噬细胞内特定mRNA的编辑。
4.建立肌腱损伤模型
为了验证CRISPR-Cas13编辑系统在肌腱损伤治疗中的效果，研究团队建立了肌腱损伤模型。他们通过在肌腱损伤部位周围包裹含有Cas13 RNP的复合膜，使Cas13 RNP能够直接接触并编辑损伤部位的巨噬细胞。
5.观察和分析实验结果：
在实验过程中，研究团队定期观察和记录肌腱损伤部位的愈合情况、巨噬细胞的活性以及SPP1（OPN编码）的表达水平。实验结果显示，通过优化CRISPR-Cas13的递送系统并设计ROS响应型释放机制，研究团队成功地实现了对巨噬细胞内特定mRNA的高效编辑。在肌腱损伤模型中，Cas13 RNP能够有效地抑制SPP1的过度表达，从而减轻巨噬细胞的活性并促进肌腱组织的修复。此外，实验还表明，通过包裹含有Cas13 RNP的复合膜于肌腱损伤部位周围，可以显著减少成纤维细胞的激活和周围组织的粘连，进一步证实了CRISPR-Cas13编辑系统在肌腱损伤治疗中的有效性。
本研究为肌腱损伤的免疫治疗提供了一种新的策略，即通过CRISPR-Cas13系统进行RNA编辑，以调节巨噬细胞的功能，从而改善肌腱的修复过程。这为未来的临床应用提供了新的可能性，并为其他类型的组织损伤修复提供了新的思路。
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