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SpCas9 Nuclease说明书

【产品名称】SpCas9 Nuclease         【分子量】164.5KDa

【产品编号】EDE0008                     【形式】液体

【产品简介】

Cas9 Nuclease (SpCas9)来源于S. pyogenes菌株,是依赖于sgRNA引导的 DNA内切核酸酶,割双链DNA。在靶标DNA存在PAM(proto-spacer adjacent motif)的情况下,Cas9 Nuclease能在sgRNA引导下特异性地剪切靶标双链 DNA,使DNA双链断裂并生成平末端。PAM序列对于Cas9识别和剪切靶标DNA是必需的,其剪切位点位于目标序列(target sequence)内,离PAM3个碱基。还可应用于体外靶标 DNA 的剪切、目的片段的克隆等实验。

【产品组分】

组分

EDE0008-100

EDE0008-1000

SpCas9 Nuclease1 μM

1 μM*100 μL(100 pmol)

 1 μM*1 mL(1000 pmol)

Buffer

500 μL*1

500 μL*1

【储存条件及有效期】

有效期1年,保存条件-20°C;如长期储存,建议置于-80°C

建议根据使用次数进行分装,避免反复冻融。

【产品特点】

采用一步法纯化制备,最大程度保留酶活性,经过测试酶活性显著高于同类产品。

【质量保证】

样品纯度:~95% SDS-PAGE鉴定)

【测试反应体系】

组分

/ μL

终浓度

5×Buffer

4

SpCas9 Nuclease1 μM

5

250 nM

1000 nM sgRNA

0.5

250 nM

1 μM DNA

0.5

25 nM

DEPC H2O

-20 μL

 

37°C反应 30 min,可通过非变性核酸电泳对实验结果进行检测。

【注意事项】

1. 为防止 RNase 污染,请保持实验区干净整洁,操作时需穿戴干净的手套、口罩,实验所用枪头、离心管等耗材均为 RNase-free

2. SpCas9 酶对热敏感,容易失活,应全程冰上配置反应体系,并在使用后立即将酶置于-20℃保存。