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基因点突变细胞

基因点突变细胞

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艾迪基因全新研发Bingo先导编辑基因定点突变平台,可提供精准、高效的基因定点突变细胞定制服务。Bingo平台是基于目前最高效、最安全的先导编辑PE (Prime Editing) 基因定点突变技术,艾迪基因凝聚十多年基因编辑经验,在上千例基因编辑CRO项目经验中总结、优化、提升,成功率远超传统基因定点突变系统。主要体现为以下五大优化。

先导编辑PE平台五大优化


服务详


人类有超过75000 种疾病和遗传变异相关,其中单碱基突变占得比例最大,但目前大多数仍没有好的治疗方法。不管是遗传病还是癌症的检测与治疗,都需要点突变的细胞株。

目前较普遍的点突变方法是基于CRISPR-Cas的基因编辑技术,该技术可以在特定基因组位置产生双链断裂(double-strandDNA breaksDSBs)后,使得外源正确供体基因序列得以通过同源重组的方式整合基因组,达到基因编辑的目的。然而,CRISPR-Cas技术一直饱受脱靶效应困扰,并且引入双链断裂也造成多余副产物、基因转座等问题,限制其在基因治疗领域发挥更重要的作用。

目前无需双链断裂的基因编辑技术仅能实现4种单碱基编辑(C→T, G→A, A→G, T→C),仍有8种编辑不能实现(C→A, C→G, G→C, G→T, A→C, A→T, T→A, T→G)。先导编辑系统借助Cas、反转录酶和特殊设计的gRNA(prime editing guide RNA ,pegRNA)突破了上述局限性,实现精确性和泛用性共存的基因编辑。

艾迪基因提供的BingoTM基因定点突变细胞定制服务正是基于先导编辑系统,可以精确、高效地定点改变细胞靶序列,帮助推进疾病研究和治疗发展。

●  细胞类型细胞系、干细胞等可转染、无限传代的细胞,艾迪基因具有300+种细胞培养经验,点击查看艾基因细胞清单

●  价格定制价格因细胞种类、项目难度而异,欢迎免费咨询:020-3223-885618102225074(微信同号)

●  周期项目周期快至10周,基因突变细胞系现货只需一周

 

服务种类


基因定点突变技术服务种类


为什么选择艾迪基因?

为什么选择艾迪基因的基因定点突变技术


服务流程


1. 设计一段带有转录模板(携带想要的基因信息)和必要Prime Binding Site(PBS)的 PE 编辑专用 gRNA——pegRNA。

crispr基因定点突变服务流程

2. Cas9切口酶在pegRNA上的sgRNA序列指引下,切割DNA单链,pegRNA 3′-端的PBS(引物结合序列)可以与切割断点前的互补序列识别配对


crispr基因定点突变服务流程

3. 逆转录酶(M-MLV RT)以pegRNA上PBS序列后的人工设计的模板序列为模板进行逆转录,将目标序列直接聚合到切口的DNA链上

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4. 编辑后的DNA 双链延伸出一段额外新合成的 DNA Flap,启动细胞自有的3‘flap-5’flap equilibration 机制,将 DNA 原有的片段切除。

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5.不匹配的DNA 双链通过错配修复(mismatch repair,MMR)机制,把非编辑链修复,整个编辑过程就完成了。

crispr基因定点突变服务流程


成功案例



案例1HCT116细胞CTNNB1基因定点突变,位点c.98C>T

实验结果:单克隆测序结果显示,突变成功