突破基因敲入瓶颈!HES-KI带你领跑基因敲入
人效率低?成本高?做基因敲入的时候这些问题总是困扰着我们。这是因为传统的基因敲入技术都会比较依赖HDR(同源定向修复)来实现,但细胞本身的修复机制往往更偏爱NHEJ(非同源末端连接),这就导致敲入成功率一再受限。即便是腺相关病毒(AAV)载体这种常用的供体递送方法,也难以避免荷载限制以及腺相关病毒基因组存在频繁串联插入的风险。但基于基因敲入在细胞治疗和工业生产领域具有巨大潜力,开发高效、精准、稳定的基因敲入方法尤为重要。
艾迪基因HES-KI技术正是为了解决这些难题而诞生!它通过在必需基因的外显子C端区域进行CRISPR编辑,结合精心设计的转基因敲入模板,使细胞成功敲入后不仅能够恢复必需基因功能,还可以整合目的基因。
HES-KI的独特之处在于其正向选择机制——如果细胞未能成功敲入,NHEJ介导的插入或缺失(Indels)将使得必需基因失活,从而直接导致细胞死亡。基于这种机制,再配合抗性筛选将确保了最终存活的细胞均为成功敲入细胞,从而显著提高了基因敲入效率。
01. 在基因治疗中,提供稳定的CAR基因整合,提高疗效。
02. 在工业生产中,目的基因表达高稳定性和均一性,保障了产品大规模生产的产量和质量。
03. 在干细胞工程中,提升iPSC的转基因敲入效率,推动再生医学发展。
04. 在疾病建模中,构建高纯度的基因修饰细胞系,为肿瘤研究和药物开发开辟新方向。
艾迪基因全新HES-KI技术,突破传统基因敲入瓶颈!通过独创的正向选择机制,显著提升敲入效率,为您的产品生产省时省力,更能根据研究需求调节目的基因的表达水平。无论是基因治疗、工业生产、干细胞工程、还是疾病建模,HES-KI都能凭借其精准、高效、稳定的特性,为科研团队提供可靠的解决方案,推动生命科学迈向新高度!
案例1
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b. Sanger测序验证:EGFP精确敲入K562 GAPDH基因C端
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c. K562 EGFP-KI细胞和WT细胞单克隆细胞株倍增时间差异不显著,EGFP插入后不影响K562细胞生长
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d. 不同K562 EGFP-KI单克隆细胞株EGFP mRNA表达量差异不显著,EGFP-KI单克隆均一性好
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e. K562 EGFP-KI单克隆细胞株经过15代连续传代培养,EGFP mRNA表达量稳定。
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f. K562 EGFP-KI 细胞图片
K562 EGFP-KI多克隆
K562 EGFP-KI单克隆
案例2
293T:
CHO-K1:

CHO-K1:


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