crRNA设计与合成

crRNA由两部分结构组成,一部分是与Cas效应器结合的发夹结构,另一部分是与靶标基因片段特异性识别的“原间隔”基序(一般为20个碱基)。crRNA通过与Cas蛋白及靶标基因片段结合形成Cas-crRNA-靶标三元复合物,然后靶标序列被Cas蛋白切割。根据不同的检测体系和Cas蛋白的类型,可以设计不同的crRNA来满足检测需求。其中,Cas12a由crRNA引导,特异性识别并剪切带PAM(5´TTTN-3´)的dsDNA靶标,Cas13a在crRNA的引导下对ssRNA靶标进行识别和剪切,不需要特定的PAM来进行靶标识别。

服务详情

服务内容 1、crRNA合成
2、crRNA设计与合成
交付标准 1、crRNA干粉(1OD/2OD)
2、合成质检报告
周期/价格   在线咨询
 
艾迪基因积累多年的CRISPR检测经验,开发了特有的crRNA设计系统,大大提高crRNA的特异性和切割活性,使CRISPR检测的灵敏度和准确度更上一个台阶,可为广大IVD企业和科研客户提供crRNA的设计和合成服务。

服务类型

可根据客户需求,综合检测对象和靶标基因等情况,进行crRNA设计与合成。 
crRNA合成 客户提供设计好的crRNA序列,交付艾迪基因进行合成
crRNA设计与合成 根据客户提供的检测对象和靶标基因序列等信息,进行crRNA设计合成与活性筛选

服务优势

自研的crRNA设计系统
crRNA具有更高的特异性和切割活性,提高CRISPR检测的灵敏度和准确度
品质保证
HPLC品级,crRNA纯度极高,可达95%以上
交付灵活
多种规格可选
专业度高
根据客户需求设计合理的方案以及提供技术支持

实验流程

 

 

数据案例

 

经艾迪基因设计系统得到的crRNA,与其他设计算法得到的crRNA进行体外切割活性测试。

检测体系中添加待检Target模版、Cas12a、crRNA和荧光探针,当crRNA与Cas12a组装成功能复合物并识别Target模版后,会激活Cas12a的反式切割活性切割荧光探针释放出荧光信号。可以通过荧光值来反映crRNA的切割活性与灵敏度。左图和右图是分别针对A1 Target和A2 Target进行测试。结果显示,艾迪基因生产的crRNA的荧光强度更强,切割活性与灵敏性明显更优。

Advantage and Characteristic

Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
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