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慢病毒包装
慢病毒（Lentivirus）是一种特殊的逆转录病毒，能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上，实现长期稳定表达。慢病毒载体的优势包括广泛的细胞感染能力、长期稳定表达、低免疫原性、大载荷能力以及相对安全性。这些特性使得慢病毒载体在生物医学研究和临床应用中具有巨大的应用潜力和价值。
服务详情
| 服务类型 | 敲除慢病毒/过表达慢病毒/干扰慢病毒/文库病毒 |
|---|---|
| 交付标准 | 1.滴度报告2.图谱3.慢病毒 |
| 周期/价格 |
 在线咨询 |
艾迪基因拥有成熟的慢病毒包装平台，可包装满足于不同实验需求的慢病毒。我司采用的慢病毒载体经过精心优化，使用成熟的慢病毒包装体系，旨在提高生物安全性、病毒转导效率和基因表达水平。采用细胞滴定法检测病毒的滴度，以最准确的检测手段确认活病毒滴度，有助于下游实验的开展。
服务优势
高效的包装体系
优化的慢病毒包装技术，提高慢病毒的包装效率和滴度，为科研实验提供了更加高效的工具
科学的滴度测定方法
采用细胞滴定法测定滴度，确保为活病毒滴度，提高实验准确性
极高的安全性
采用的慢病毒载体序列经过精心优化，病毒包装体系成熟，具有极高的安全性
团队经验丰富
技术人员专业性高，经验丰富，可根据客户需求定制慢病毒
服务类型
可根据客户需求，提供多种类型的慢病毒包装服务。
| 敲除慢病毒 | 将CRISPR/Cas9基因敲除系统递送至细胞中，实现目的基因的有效敲除 |
|---|---|
| 过表达慢病毒 | 将外源基因片段递送至细胞中，实现基因片段高效、稳定地表达 |
| 干扰慢病毒 | 将shRNA干扰系统递送至细胞中，实现目的基因长期、稳定地敲降 |
| 文库病毒 | 将CRISPR/Cas文库递送至细胞中，构建基因编辑混合细胞池 |
交付标准
| 基因敲除病毒、过表达病毒、干扰病毒 | CRISPR/Cas9文库慢病毒 |
|---|---|
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滴度报告 |
滴度报告 |
| 质粒图谱 | 质粒图谱 |
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操作说明 |
文库慢病毒（ ≥1×10^6 TU/mL,交付规格：1×10^8 TU、5×10^8 TU、1×10^9 TU） |
| 慢病毒（滴度：≥1×10^6 TU/mL，1 mL） |
服务流程
应用案例
基因组规模的 CRISPR-Cas9 敲除和转录激活筛选
CRISPR-Cas9作为一种强大的遗传筛选工具，可以用于深入理解基因功能和调控网络，尤其是在疾病相关的基因研究中具有重要应用潜力。为描述如何使用CRISPR-Cas9系统进行基因敲除和转录激活的筛选，Joung等人通过将定制的sgRNA库克隆到慢病毒载体、在HEK293FT细胞中包装并收集病毒粒子，随后用于转导目标细胞，实现了基因组规模的CRISPR-Cas9敲除和激活筛选，成功鉴定了与特定表型相关的关键基因。
筛选候选基因中的慢病毒包装方案
Joung, Julia et al. “Genome-scale CRISPR-Cas9 knockout and transcriptional activation screening.” Nature protocols vol. 12,4 (2017): 828-863.
Advantage and Characteristic
Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
Optimazied Strategy
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参考文献
通过CBLB-OE慢病毒构建CBLB过表达的293T 细胞
Exploring the role of CBLB in acute myocardial infarction: transcriptomic, microbiomic, and metabolomic analyses
肠道微生物群和代谢物的特定改变与急性心肌梗死（AMI）相关，CBLB 可能在其中发挥重要作用。然而，这些相互作用的具体机制尚未充分研究，导致理解上的重大不足。本研究旨在通过转录组测序、16S rDNA 和非靶向代谢物分析，探讨 CBLB 干预对 AMI 小鼠的影响。研究团队采用多组学综合策略，包括将 CBLB 慢病毒包装载体转染入 293T 细胞，然后对 AMI 小鼠进行干预，并进行病理染色、粪便 16S rDNA 测序和血清非靶向代谢组学分析。结果显示，CBLB 干预显著减少了小鼠心脏梗死区的炎症细胞浸润和胶原纤维形成，并导致微生物群、代谢物和差异表达基因（DEGs）的关键变化。这表明 CBLB 在 AMI 调控中可能起重要作用。研究确认了 CBLB 干预后差异基因、代谢物和微生物群在 AMI 调控中的潜力，为未来探索 CBLB 的治疗应用提供了基础。
通过SENP1-shRNA慢病毒构建SENP1敲低的胶质瘤干细胞（GSCs）
SENP1-Mediated deSUMOylation Regulates the Tumor Remodeling of Glioma Stem Cells Under Hypoxic Stress
本研究探讨 SENP1 介导的去SUMO化在缺氧条件下对胶质瘤干细胞（GSCs）恶性行为的影响及其临床价值。缺氧条件下，HIF1α 上调激活 GSCs 中的 Wnt/β-连环蛋白信号通路，支持胶质母细胞瘤（GBM）生长。SENP1 介导的去SUMO化稳定 HIF1α 和 β-连环蛋白的表达，促进 GSCs 引发的肿瘤形成。使用慢病毒包装的 SENP1 shRNA 下调 GSCs 中的 SENP1 表达，结果显示 GSCs 的增殖和分化减弱，肿瘤发生减少。HIF1α 诱导的 Wnt/β-连环蛋白激活依赖于 SENP1 介导的去SUMO化，促进 GSC 驱动的 GBM 增长。研究表明，靶向 SENP1 可能有效提高 GBM 的治疗效果。
FAQ
什么是慢病毒包装？
慢病毒是一种将外源基因导入细胞的基因递送工具。通过如293T等工具细胞，将带有目标DNA片段的慢病毒载体包装成具有细胞感染活性的慢病毒颗粒。这个包装过程包括：构建慢病毒载体、准备包装质粒、工具细胞培养、质粒转染、收集病毒颗粒、病毒颗粒纯化和浓缩和滴度测定等过程。
慢病毒转导后，细胞状态很差甚至出现大量死亡，如何解决？
细胞被慢病毒感染后，细胞状态不佳，这种情况有较多可能的因素导致的，以下是一些可能的原因和相应的解决方案：
1.病毒滴度过高：高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性，使细胞无法正常生长。解决方案是降低病毒的滴度，进行一系列稀释实验，找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度
2.细胞状态不佳：感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。解决方案是确保细胞在最佳状态下进行感染，例如在感染前24小时换新鲜培养基，并确保细胞密度适中
1.病毒滴度过高：高滴度的慢病毒可能导致细胞毒性，使细胞无法正常生长。解决方案是降低病毒的滴度，进行一系列稀释实验，找到一个既能有效转染又不影响细胞生长的滴度
2.细胞状态不佳：感染前细胞的健康状态可能影响感染后的生长。解决方案是确保细胞在最佳状态下进行感染，例如在感染前24小时换新鲜培养基，并确保细胞密度适中
为什么选择慢病毒作为基因传递工具？
慢病毒具有很高的转导效率和长期稳定的基因表达能力，特别适合于难以转染的细胞类型。此外，慢病毒能够将外源基因整合到宿主基因组中，保证了长时间的基因表达。
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