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电转染
将基因编辑系统往细胞中实现有效的递送，是实现细胞基因编辑的重要前提，这一步骤的递送效率与编辑效率呈正相关。电转法，是一种高效的递送方式。通过高压电脉冲在细胞膜上打孔，将外源DNA、RNA或其他分子导入细胞中。这种转染方法可用于大多数细胞类型，具有转染高效、适用范围较广等优势。
服务详情
| 电转优点 | 1、递送效率高2、细胞适用性广 |
|---|---|
| 周期/价格 |
 在线咨询 |
艾迪基因拥有成熟的电转染平台，且结合多年的基因编辑经验，建立了一套高效、完善的电转染实验体系，可提供优质的电转染递送服务，高效地将基因编辑体系递送到目标细胞中。
服务优势
转染效率高
可瞬时有效递送质粒、mRNA或RNP复合物
快速转染大量细胞
能够在短时间内转染大量细胞
细胞适用性广
可适用大多数细胞类型
成熟的电转平台
配备专业的仪器、方案和技术人员
技术路线
应用案例
应用电转方法将HES-KI系统递送至K562细胞中，实现EGFP在Safety Harbor位点插入并成功表达。
1）方法
2）结果
K562细胞电转HES-KI系统未压力筛选细胞Pool
参考文献
传统的基因编辑动物的生成依赖于向受精卵（zygotes）微注射CRISPR/Cas9蛋白和供体DNA，这种方法效率不高，耗时且需要高技术技能。Remy等报告了一种优化的电穿孔（electroporation）方法，用于将sgRNA和Cas9蛋白结合或不结合ssODN（单链DNA片段）传递到完整大鼠受精卵中，以提高基因编辑的效率。该方法使用ssODN作为供体模板，可以在25-100%的分析动物中实现精确的基因敲入（knock-in）突变。
基于ssODN的CRISPR/Cas9介导HDR策略
参考文献
Remy, S., Chenouard, V., Tesson, L. et al. Generation of gene-edited rats by delivery of CRISPR/Cas9 protein and donor DNA into intact zygotes using electroporation. Sci Rep 7, 16554 (2017). https://doi.org/10.1038/s41598-017-16328-y.
Advantage and Characteristic
Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
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FAQ
在进行基因递送时，培养细胞需要注意哪些问题？
保持细胞培养物的活性，不要让细胞保持汇合超过24小时。解冻新细胞可以恢复转染活性。最佳的细胞铺板密度对于不同的细胞类型或应用而言是不同的，但对于贴壁细胞，转染时汇合度在70%至90%或细胞密度为5×10^5至2×10^6个悬浮细胞/ml通常会产生良好的转染结果。确保细胞在转染时未完全汇合或处于固定相。
如何选择合适的基因递送方式？
选择适合的基因传递系统需要根据具体实验条件、研究目的以及细胞类型等因素综合评估。定量比较各种系统的传递效率、细胞毒性和稳定性等是进一步明确选择的重要步骤。
病毒递送系统适用于需要高递送效率、基因持续表达的试验，细胞可承受较高的细胞毒性和免疫反应；如果需要较低的细胞毒性和免疫反应，并且操作简便、成本低，则选择脂质体基因传递系统。如果需要高递送效率、递送大片段DNA，且能接受较高的操作难度，基因枪基因递送系统是一个可选的方法。假如需要高递送效率，操作相对简单，且无需特殊设备，电穿孔递送系统可能是一个适合的选择。
病毒递送系统适用于需要高递送效率、基因持续表达的试验，细胞可承受较高的细胞毒性和免疫反应；如果需要较低的细胞毒性和免疫反应，并且操作简便、成本低，则选择脂质体基因传递系统。如果需要高递送效率、递送大片段DNA，且能接受较高的操作难度，基因枪基因递送系统是一个可选的方法。假如需要高递送效率，操作相对简单，且无需特殊设备，电穿孔递送系统可能是一个适合的选择。
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