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基因过表达载体构建
基因过表达，是将目标基因递送到宿主细胞中，使该基因过量表达。基因过表达广泛用于基因功能研究、疾病模型构建、药物筛选、蛋白质生产以及基因治疗等方向。
服务详情
| 服务类型 | 慢病毒稳定过表达载体构建/转座子稳定过表达载体构建/瞬时过表达载体构建/其他特殊需求的载体构建 |
|---|---|
| 交付标准 | 1.质粒图谱2.质粒测序结果3.质粒扩增操作说明4.质粒 |
| 周期/价格 |
 在线咨询 |
艾迪基因基于多年的细胞生物学经验，建立了一套成熟的基因过表达载体构建实验体系。可以提供稳定过表达载体或瞬时过表达载体等构建服务。我们可采用慢病毒转导方法，将不超过5 kb的外源基因高效整合到宿主细胞基因组中，并在多次传代后仍保持稳定的表达效果。此外，我们还可应用转座子方法，实现超过5 kb目的基因在细胞内的长期稳定表达。
服务优势
结合我司提供的慢病毒包装系统，能够稳定地将目标基因整合至靶细胞基因组中，为基因编辑提供了更加科学的工具
我司的转座系统经过优化和改良，具有高效的递送能力和较高的装载容量
服务类型
可根据客户需求，综合基因等情况，进行基因过表达载体的设计和构建。
| 1 | 慢病毒稳定过表达载体构建 |
|---|---|
| 2 | 转座子稳定过表达载体构建 |
| 3 | 瞬时过表达载体构建 |
| 4 | 其他特殊需求的载体构建 |
质粒图谱
Lenti 过表达慢病毒质粒图谱
pPB 过表达转座子质粒图谱
Advantage and Characteristic
Optimazied Strategy
We have create a unique sgRNA Design Logic
Optimazied Strategy
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Optimazied Strategy
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参考文献
SKOV3 和 OVCA420 细胞系中过表达lnc-CTSLP8
The lnc-CTSLP8 upregulates CTSL1 as a competitive endogenous RNA and promotes ovarian cancer metastasis
卵巢癌具有高度致死性且预后不良，其原因是转移。长链非编码RNA（lncRNA）在肿瘤发展中起关键作用，但在卵巢癌转移中的作用尚不明确。研究者通过公共数据库（TCGA和GEO）分析并通过qRT-PCR验证lnc-CTSLP8在卵巢癌中的表达。利用慢病毒载体和CRISPR/Cas9系统构建lnc-CTSLP8过表达和敲除细胞系，分析细胞增殖、迁移和侵袭。在体内研究中，使用卵巢原位肿瘤小鼠模型，观察细胞中的自噬和EMT标志物，并通过RNA免疫沉淀和双荧光素酶报告基因实验确认lnc-CTSLP8与miR-199a-5p的相互作用。结果发现lnc-CTSLP8在转移性卵巢癌中高表达，过表达促进卵巢癌的发展并增强自噬和EMT。机制上，lnc-CTSLP8作为竞争性内源RNA上调CTSL1并表现出致癌效应。CTSL1抑制剂和miR-199a-5p过表达消除了lnc-CTSLP8过表达的效果。研究表明lnc-CTSLP8作为ceRNA在卵巢癌中起作用，是潜在的治疗靶点。
FAQ
艾迪基因载体构建的宿主菌是什么？顾客可以使用什么类型菌株来扩增质粒载体？
载体在进行扩增时，通常会使用大肠杆菌（E. coli）菌株来进行。在实验操作中，常用的大肠杆菌菌株是DH5α。DH5α适用于大多数非重组型载体。对于重组型载体，如慢病毒载体和转座子载体等，可以使用Stbl3菌株进行扩增。Stbl3是一种特殊的大肠杆菌（E. coli）菌株，来源于，HB101 E. coli strain，其基因组含有重组酶recA13突变，这可以有效地抑制长片段末端重复区的重组，从而降低错误重组的概率。
如何选择合适的载体类型？
选择载体时，应考虑实验的目的和宿主细胞的类型。例如，质粒载体常用于细菌中基因的表达或扩增，病毒载体则更适合用于哺乳动物细胞中的基因转导。除此之外，载体的启动子、复制子以及抗生素选择标记也需要根据具体需求进行选择。
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