产品基本信息
AapCas12b(又名C2c1)核酸酶源自酸性脂环酸芽孢杆菌Alicyclobacillus acidophilus,是一种依赖 crRNA介导的核酸内切酶,在靶标双链DNA存在PAM(TTTV)序列的情况下,由crRNA介导特异性识别并切割双链DNA,而AapCas12b特异性切割靶标单链DNA则不依赖PAM序列。AapCas12b-crRNA复合物与互补单链DNA或者双链DNA结合后,其非特异性ssDNA反式切割活性被激活。AapCas12b的最佳反应温度为60℃,相比于Cas13a和Cas12a,更耐高温,因此适合与环介导等温扩增(LAMP)联用,在现场快速核酸检测领域具有广泛的应用前景。
产品组分
组分 | EDE0006-50 | EDE0006-100 | EDE0006-500 |
AapCas12b Nuclease | 5 μM*10 μL (50pmol) | 5 μM*20 μL (100pmol) | 5 μM*100 μL (500 pmol) |
AapCas12b Cleavage Buffer(10×) | 40 μL*1管 | 80 μL*1管 | 400 μL*1管 |
反应体系
组分 | 终浓度 | 体积 ( μL) |
10× Cleavage Buffer | 1× | 2 μL |
5 μM AapCas12b Nuclease | 150-250 nM | 0.8 μL(200 nM) |
500 nM crRNA | 150-250 nM | 8 μL(200 nM) |
250 nM ssDNA Reporter | 150-250 nM | 1 μL(200 nM) |
1 μM DNA target | 150-250 nM | 4 μL(200 nM) |
DEPC H2O | ||
Total | 20 μL | 20 μL |
反应条件
使用实时荧光定量PCR仪或恒温扩增仪检测荧光信号,60℃反应,每 30 sec采集一次荧光信号。也可在紫外灯下直接观察荧光信号。
储存条件及有效期
有效期1年,保存条件-20°C;如长期储存,建议置于-80°C。 建议根据使用次数进行分装,避免反复冻融。