产品原理
本试剂盒是基于一种新型核酸恒温扩增技术:重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA),可以在37~42 ℃条件下,10~30 min内实现待测靶标的快速扩增。引物与重组酶形成复合物,首先在双链DNA中寻找同源序列,然后通过重组酶的链置换活性将引物插入同源位点,在单链结合蛋白作用下置换DNA链。接着重组酶被分解,引物的3'末端被链置换并与聚合酶结合。最后模板链分开,继续延长新的DNA链,形成两条新的dsDNA。
在扩增体系中,添加了针对检测模板而设计的特异分子探针。该探针结合至检测模板,随着反应体系的每一轮扩增而释放信号,使用胶体金技术(三明治夹心法)可以对恒温扩增结果进行快速判断。
产品特点及优势
1. 检测结果准确:灵敏度高(可达1 copies/ml);特异性强。
2. 操作简单:配液步骤少;引物探针设计简单。
3. 反应时间短:仅需30min。
4. 对设备要求低:金属浴、水浴锅等即可完成扩增。
5. 判断检测结果迅速:直观的检测结果展示方式,非常适合于现场快速检测的需求。
应用方向
试剂盒组分
组成 | 含量 |
A buffer | 1.6 mL×1 管 |
B buffer | 150 μL×1 管 |
正对照模板 | 30 μL×1 管 |
正对照引物Mix | 60 μL×1 管 |
试剂 | 48 份 |
使用说明书 | 1 份 |
体系配制
组分 | 体积 (μL) |
A buffer | 29.4 |
上游引物 (10 μM) | 2 |
下游引物 (10 μM) | 2 |
ddH2O 和 DNA 模板 | 14.1 |
B buffer | 2.5 |
总体积 | 50 |
反应条件
37-39 ºC; 8-12 minutes。
结果判读
储存条件
1.运输温度:≤ 20 ºC的恒温环境;
2.储存条件:储存温度 ≤ -20 °C(± 5 °C)恒温环境,避光保存,避免重压、反复冻融;
3.产品有效期:14个月;
4.生产日期见外包装。