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产品基本信息
LwaCas13a（又名C2c2）核酸酶来源于Leptotrichia wadei菌株。LwaCas13a属于Ⅱ类Ⅵ型 CRISPR系统效应蛋白，是由crRNA介导的核酸内切酶，在识别并切割靶标RNA时，其“附属切割”活性被激活，可非特异切割体系中单链 RNA(ssRNA)。通过设计两端标记荧光基团或者其他标记物的RNA探针，可实现CRISPR/Cas13a对RNA模板的检测和信号放大。可通过荧光仪或试纸观察结果。
产品组分
| 组分 | EDE0001-100 | EDE0001-500 | EDE0001-1000 |
| LwaCas13a Nuclease | 1μM*100 μL (100pmol) | 1 μM*500 μL (500 pmol) | 1 μM*500 μL*2 管 (1000 pmol) |
| LwaCas13a Cleavage Buffer (5×) | 500 μL*1 管 | 500 μL*4 管 | 1mL*4 管 |
反应体系
| 组分 | 终浓度 | 体积 ( μL) |
| 1 μM LwaCas13a | 50 nM | 1 |
| 5 × Cleavage Buffer | 1× | 4 |
| 10 U RNase Inhibitor | 0.5 U | 1 |
| 500 nM crRNA | 25 nM | 1 |
| 2 μM ssRNA Reporter | 125 nM | 1.25 |
| 1 μM RNA target | 50 nM | 1 |
| DEPC H2O | ||
| Total | 20 μL | 20 μL |
反应条件
使用实时荧光定量PCR仪或恒温扩增仪检测荧光信号，37℃反应，每 30 sec 采集一次荧光信号。
竞争性能交叉分析
横坐标为反应时间，纵坐标为 Bio-rad CFX96荧光PCR仪检测结果。由图可见，相同的条件下，本产品在20分钟内可完全切割RNA报告探针，并达到荧光峰值，而其他同类产品荧光值明显较低，反应速度较慢，可见本品切割效率显著高于同类产品。
Fig 1. Results of Cas13 collateral cleavage at different product.
储存条件及有效期
有效期1年，保存条件-20°C；如长期储存，建议置于-80°C。 建议根据使用次数进行分装，避免反复冻融。
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