产品基本信息
Cas9 (SpCas9)核酸酶来源于S. pyogenes菌株,是依赖于sgRNA引导的 DNA内切核酸酶,切割双链DNA。在靶标DNA存在PAM(proto-spacer adjacent motif)的情况下,Cas9 Nuclease能在sgRNA引导下特异性地剪切靶标双链 DNA,使DNA双链断裂并生成平末端。PAM序列对于Cas9识别和剪切靶标DNA是必需的,其剪切位点位于目标序列(target sequence)内,离PAM区3个碱基。还可应用于体外靶标 DNA 的剪切、目的片段的克隆等实验。
产品组分
组分 | EDE0008-100 | EDE0008-1000 |
SpCas9 Nuclease | 1 μM*100 μL (100 pmol) | 1 μM*1mL (1000 pmol) |
Buffer (5x) | 100 μL*1 管 | 500 μL*1 管 |
反应体系
组分 | 体积 (μL) | 终浓度 |
5× Cleavage Buffer | 4 | 1x |
SpCas9 Nuclease (1 μM) | 5 | 250 nM |
1000 nM sgRNA | 0.5 | 250 nM |
1 μM DNA | 0.5 | 25 nM |
DEPC H2O | Add to 20 μL | - |
反应条件
37°C反应 30 min,可通过非变性核酸电泳对实验结果进行检测。
储存条件及有效期
有效期1年,保存条件-20°C;如长期储存,建议置于-80°C。 建议根据使用次数进行分装,避免反复冻融。